海参中蛋白的测试方法

海参中蛋白的测试方法

1、使用仪器

K9860凯氏定氮仪;SH220石墨消解仪;WD01排废系统;

2、使用试剂

浓硫酸(密度为1.8419g/L);催化剂(硫酸钾;硫酸铜);0.1mol/L硫酸或盐酸滴定液;2%硼酸;40%氢氧化钠;甲基红-溴甲酚绿混合指示剂;

3、实验方法

1)干燥的海参

a.样品前处理：

待测海参样，粉碎后过80目筛。

b.样品 消解：

取样品0.2克;加入催化剂3g(催化剂为 硫酸铜,硫酸钾1:15比例混匀);吸取8ml浓硫酸加入消化管，同时做样品空白，样品空白除样品不加其他试剂正常加入，用SH220石墨消解仪消解，消解温度：升温至300℃消化20-30分钟，再升温至420℃消解至液体呈蓝绿色澄清透明，再消解30-60分钟。

c.样品 蒸馏：

用K9860全自动凯氏定氮仪进行蒸馏测试，氢氧化钠为浓硫酸的4倍为宜(具体看加氢氧化钠后 样品是否变黑褐色，保证一定为过量的氢氧化钠)。

2)湿的海参

a.样品前处理：

待测海参样，用剪刀剪碎(剪的碎点即可，知道不能剪为止)。取样2-3g

b.样品 消解：

各加入催化剂3.5g(催化剂为 硫酸铜,硫酸钾1:15比例混匀);静止五分钟，吸取10ml浓硫酸加入消化管，再静止十分钟(样品有水，加浓硫酸静止数分钟后消解保证安全)，做样品空白2个，样品空白除样品不加其他试剂正常加入，用SH220石墨消解仪消解，消解温度：升温至300℃消化20-30分钟，再升温至420℃消解至液体呈蓝绿色澄清透明，再消解30-60分钟，冷却至室温。

c.样品 蒸馏：

用K9860全自动凯氏定氮仪进行蒸馏测试，氢氧化钠为浓硫酸的4倍为宜(具体看加氢氧化钠后 样品是否变黑褐色，保证一定为过量的氢氧化钠)。