高效液相色谱检测婴幼儿奶粉中的维生素增加剂

高效液相色谱检测婴幼儿奶粉中的维生素增加剂

烟酸也称作维生素B3，它是人体必需的13种维生素之一，烟酸可在人体内转化为烟酰胺，烟酰胺是辅酶Ⅰ和辅酶Ⅱ的组成有些，参与体内脂质代谢，安排呼吸的氧化进程和糖类无氧分化的进程。二者总称维生素PP，用于抗糙皮病、血扩张药，大量用于食物、饲料出产的增加剂，在乳制品出产中也有使用。

这两种物质对人体尽管也有正面作用，但也得限制摄入量，操控饲料、食物等出产的增加就显得尤为重要。本办法采用高效液相色谱法检查儿童配方奶粉中烟酸、烟酰胺两种成分含量。

部分试验

原理

取适当该品加水取适当该品加水超声波震动获取，经进样器进入高效液相色谱体系，色谱柱分别，紫外检查器检查，保存时刻定性，峰面积定量核算。

基准品溶液制造

精细称取烟酸及烟酰胺基准品适当，分别制备1.0mg/ml基准品储藏液和40μg/mL基准品中心液。

烟酸及烟酰胺混合基准系列测定液

分别精确汲取烟酸及烟酰胺混合基准中心液0.0ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml与50ml

容量瓶中，用水定容。该基准系列浓度分别为0.00μg/mL、0.80μg/mL、1.60μg/mL、4.00μg/mL、8.00μg/mL。有了保证基准品溶液蜕变，尽量临用前配。

样品溶液装备

不含淀粉的试样：称取混合均匀固体试样约3.0g(精确到0.0001g)参加约25mL的水，于锥形瓶中，振摇，需充沛溶解，并冷却至室温。

获取：将上述锥形瓶置于超声波振动器中振动约10min。

沉积及定容：待试样溶液降至室温后，用盐酸(2.4mol/L)调理试样溶液的pH值至1.7±0.1，放置约2min后，再用氢氧化钠溶液(2.5mol/L)调理试样溶液的pH值至4.5±0.1。混匀后经滤纸过滤，用水反复冲刷锥形瓶，滤液合并于50mL容量瓶中，用水定容至刻度，滤液再经0.45μm微孔滤膜加压过滤，即为试样待测液。

剖析条件

检查器：紫外检查器

色谱柱：(粒径5μm150mm×4.6mm)

检查波长：261nm

进样量：10μL

柱温：室温

流速：1.0mL/min<

活动相：精确量取甲醇70mL，异丙醇20mL，精确称取庚烷磺酸钠1g，用910mL水溶解并混匀后，用高氯酸调pH至2.1±0.1经0.45μm有机相膜过滤。

曲线方程：Y=5.0599e-0.005*X+2.4334e-0.001

相关系数：0.9997

样品2基准曲线及线性系数：

曲线方程：Y=4.6683e-0.005*X+2.7019e-001

相关系数：0.9996

核算

核算公式：

X1或X2=

X1或X2——试样中烟酸或烟酰胺的含量，单位为微克每百克(μg/100g);

M——试样的质量，单位为克(g);

Ci——试样待测液中烟酸或烟酰胺的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);

V——试样溶液的体积，单位为毫升(mL)。

试样中维生素烟酸总含量的核算

试样中维生素烟酸的总含量按(2)式核算：

式中：

X=X1+X2............(2)

X——试样中维生素烟酸的总含量，单位为微克每百克(μg/100g);

X1试样中烟酸的含量，单位为微克每百克(μg/100g);

X2试样中烟酰胺的含量，单位为微克每百克(μg/100g);

以重复性条件下取得的两次独立测定成果的算术平均值表明，成果保存两位有用数字。

核算成果

样品1烟酸、烟酰胺含量分别为：0.04μg/100g、0.31μg/100g

样品2烟酸、烟酰胺含量分别为：0.04μg/100g、0.31μg/100g

定论

该办法检查儿童配方奶粉中烟酸、烟酰胺含量，具有成果快速、精确、牢靠、检出限低一级多种优势，可作为儿童配方奶粉中烟酸、烟酰胺含量检查的首选办法，也可作为相似检查的参阅办法，参阅价值极高。