乳与乳制品中非蛋白氮含量测定方法的改进-北京仪联四海科技有限公司

乳与乳制品中非蛋白氮含量测定方法的改进

乳与乳制品中非蛋白氮含量测定解决方案

起草人：王静端礼钦等

1范围

本方案适用于乳与乳制品中非蛋白氮含量的测定方法。

本方案检出限为4.0×10^-5 g/100 g

2 原理

用15%的三氯乙酸沉淀乳与乳制品中的蛋白质,离心取上清液，经催化消化，分解出的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用加有指示剂的硼酸吸收后，用0.02 mol/L HCl滴定，根据酸的消耗量换算样品中非蛋白氮的含量。

3 仪器与试剂

除特别说明之外，仅使用分析纯试剂

3.1海能全自动定氮仪K9860：最小滴定体积3.5 μL；

3.2 SH220石墨消解仪：200-500 ℃；

3.3高速冷冻离心机：4000-12000 r/min；

3.4涡旋混合器：1500-4500 r/min；

3.5分析天平：感量0.0001 g；

3.6水：GB/T 6682一级水；

3.7蔗糖（C₁₂H₂₂O₁₁）：含氮质量分数不大于0.002 %；

3.8浓硫酸；

3.9五水硫酸铜（CuSO₄·5H₂O）；

3.10硫酸钾；

3.11盐酸标准滴定溶液[C_Hcl=0.02 mol/L]：优级纯盐酸，标定按GB/T 5009.1-2003附录B进行；

3.12三氯乙酸溶液：150 g/L；

3.13氢氧化钠溶液：400 g/L；

3.14硼酸-指示剂（甲基红-溴甲酚绿乙醇溶液）吸收液：取甲基红-溴甲酚绿乙醇溶液指示剂（甲基红1 g/L-溴甲酚绿5 g/L）10 mL与20 g硼酸定容至1 L，用0.05 mol/L氢氧化钠溶液调整pH至4.2左右。

4分析步骤

4.1试样制备

贮藏在冰箱中的乳与乳制品，应在试验前取出回复至室温。

液态试样：摇匀后，置于离心管中准确称取试样5.0000 g。

固态试样：置于离心管中准确称取试样5.0000 g。乳粉加人45 mL温水搅拌均匀；干酪加人20 mL温水混匀；黄油温热熔化。吸取5 mL样品称量，待测，精确到0.0001 g。

4.2 样品处理

往盛有样品的离心管中加入15 mL 15%三氯乙酸溶液，准确称量，漩涡3 min，8000 r/min离心5 min，准确称取10 g上清液置于消解管中，再加入0.1 g CuSO₄•5H₂O，2 g K₂SO₄及5 mL浓硫酸。置于消解仪中，260℃消解至泡沫停止，420℃消解1 h。取下放冷，加入10 mL去离子水。

4.3 定氮蒸馏

往定氮仪中放置好指示剂-硼酸吸收液和0.02 mol/L 盐酸标准滴定溶液。将消解管置于定氮仪中，设置每样加入20 mL 400 g/L NaOH溶液，运行定氮仪进行自动蒸馏滴定。

4.4 空白试验

试剂空白试验：取0.1 g蔗糖于离心管中，其余步骤相同。

仪器空白试验：取一洁净消解管，加入10 mL去离子水，进行蒸馏滴定。

5结果计算

6精密度

在重复性条件下获得的三次独立测定结果的相对标准偏差不得超过5%。

乳与乳制品中非蛋白氮含量测定方法的改进

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