全自动凯氏定氮仪测定食品中蛋白质

全自动凯氏定氮仪测定食品中蛋白质

蛋白质为复杂的含氮有机化合物,是由各种氨基酸以肽键连接而成,所含元素主要为碳、氢、氧、氮及硫等。各类食物的蛋白质含量很不均匀,其中蛋白质含量测定是评价食物营养价值的重要指标之一。蛋白质含量测定方法很多,如双缩脲法、Lowry 法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、电流法等,但存在操作比较繁琐、费时或仪器昂贵等不足之处,通常采用经典的凯氏定氮法仍是食品分析、营养和生化研究中最广泛应用而较精确的方法,但操作也比较费时费力,近来已有特用的蛋白质分析仪。K9860N全自动凯氏定氮仪是目前国内最先进的定氮仪,它不仅省时省力,而且数据准确可靠,便于检测、分析研究。

1材料与方法

1.1仪器与试剂
1.1.1K9860N全自动凯氏定氮仪(济南海能仪器有限公司);
1.1.2样品消化器:SH520石墨消解仪(济南海能仪器有限公司);
1.1.3盐酸标准溶液:0. 1069 mmol/L ,1. 0690 mol/L 盐酸标准储备液100 mL 加水定容至1000 mL
1.1.4氢氧化钠溶液400 g/L ,4000 g 氢氧化钠溶于10 L水;
1.1.5浓硫酸(分析纯)
1.1.6含溴甲酚绿和甲基红指示剂的1 %硼酸吸收溶液,取100 g硼酸溶于10 L,添加100 ml溴甲酚绿溶液(100 mg溴甲酚绿溶于100 mL乙醇溶液)70 mL甲基红溶液(100 mg甲基红溶于100 mL乙醇溶液)
1.1.7铜催化剂“KJ ELTABS CU/ 3. 5”,瑞典FOSS TECATOR公司。

1.2测定方法 
称取样品放入消化管, 10ml 左右浓硫酸慢慢摇动将样品浸湿。把消化管放入已预热至420 ℃的消化器,大约30 - 60 min 样品消化呈透明蓝绿色液体,取出冷却15- 20 min ,将消化管放入K9860N全自动凯氏定氮仪蒸馏器,关上安全门,待仪器自动蒸馏、滴定、计算并打印结果。
 
2结果与讨论
 
2. 1精密度测定
    取蛋白质含量不同的6 种样品,每一种样品平行测定6,测定结果的相对标准偏差(RSD) 均小于2 % ,表明K9860N全自动凯氏定氮仪的精确度良好;
 
  2. 2准确度测定
    蛋白质含量不同的6 种样品,进行加标(硫酸亚铁铵) 回收试验 ,硫酸亚铁铵的回收率在99 %以上,表明K9860N全自动凯氏定氮仪准确度良好;
 
  2. 3方法对比
    K9860N全自动凯氏定氮仪和经典的凯氏定氮法分别对6种样品测定其蛋白质含量,结果表明,两种方法对同一样品的测定结果无差异显著性( t = 1. 0 ,P > 0. 05)
 
3小结
    由上述实验结果,我们看出K9860N全自动凯氏定氮仪具有操作简便快速、省时省力准确度高、精密度高等特点。它与经典的凯氏定氮法作比较,测定食品中蛋白质含量,结果令人满意。

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