索氏脂肪提取器测定粗脂肪时应注意的问题
索氏脂肪提取器测定粗脂肪时应注意的问题
饲料中粗脂肪测定是常规测定中非常重要的项目。用索氏脂肪提取器测定 粗脂肪是最常用方法之一。目前在许多基层饲料厂使用相当频繁。但在使用中需 要注意的方面很多。
1. 做好饲料样品的预处理
一般采集或送检的样品都有500~1000g左右,由于饲料中成分复杂,在生产或运输中由于各组份比例、比重不同未混匀或因路途颠簸分层而失去了原来 的均匀度,由于做样时称取的数量很少,因此在粉样前应先将样品在报纸上利用 四角对角反复混合均匀。在粉碎过程中应尽量避免饲料发热,若样品在粉碎过程 中发热,应注意等完全冷却至室温后再称样。经过这样的预处理称取的少量样品才具有代表性,测定的结果才能反应该料的真实脂肪含量。称样前应提前30min开启天平。
2. 称取样品
样品由于粗脂肪含量各不相同,因此在称取时不同的料称样量也有差异,一 般粗脂肪含量在10%以上的每个平行样只需称取1.5~2.0g,若在10%以下需称取2.0~3.0g,称取好的样品应用较大滤纸完全包好再用线绳扎紧确保料不会漏 出,滤纸包应尽量紧凑,长度不能长于索氏脂肪提取器提取室的高度。有些基层的化验员称取0.5~1.0g样 品,那样做起来由于称样量太小经常不平行。称取好的样品应在烘箱105℃烘2h以除去其中的水分。
3. 做好抽提准备
抽提瓶在使用前应先检查完全干净后放人 2~3粒干净的沸石再放到烘箱中于105℃烘2h,然后放于干燥器中冷却30min,带上干燥洁净的手套称取抽提瓶的重量。使用索氏脂肪提取器前应先检查提取室应干燥无水再用。水浴锅在使 用前应检查水面高度应达锅高的三分之二以上,要保证水面的高度超过提取瓶 中乙醚的高度。冷凝管的上部应检查是否用棉花塞好,否则在提取过程中乙醚就会挥发流失。水浴锅的温度冬春较冷时一般设在60℃,夏秋较热时设在55℃。回流的总次数为50~60次 ,每小时10~12次,时间为5~6个小时,含油高的样品回流次数可增加至70次。加入乙醚的量一般为60~100ml。安装抽提设备时应注意抽提瓶和抽提室之间、抽提室和冷凝管之间的摩沙口一定要旋转拧紧。
4. 抽提
在抽提过程中,经常发生的问题是:各冷凝管之间连接的胶管因使用时间过长老化而被忽视常常发生漏水现象,在使用前应注意检查,及时更换。在抽提过程中一定要注意各冷凝管之间连接的胶管摆放通畅,否则会影响冷凝管中水的流通,经常会发生乙醚挥发流失的情况,因此在提取的过程中一定要间隔30mm左右观察水流是否通畅,水压是否稳定。有异常现象要及时调整。实验中经常因连接胶管摆放不畅使回水不通,乙醚流失停止回流,均因麻痹大意而不知所措。抽 提前应检查脂肪提取器顶部所塞棉花是否存在并塞好。
5. 回收
回流前往提取室加乙醚或回流结束回收乙醚时注意打开通风系统。以尽量 减少乙醚挥发对人体的危害。抽提结束后回收乙醚时,一定要注意左手先握好抽提室磨砂口,注意左手一定要有适当的向下的力量,但不能将抽提瓶提离水浴锅底部,否则经常会发生因抽提瓶和抽提室旋转连接不紧而将抽提瓶掉入水中的现 象,那将前功尽弃。左手在握紧抽提室摩沙口的同时右手握紧冷凝管中部,两手 反方向适度用力旋转,待松动后右手上移冷凝管2~3mm,等无水乙醚滴下时左手不离开抽提室上部而适度向下的力量不减然后和右手配合将冷凝管安全固定 在索氏脂肪提取器上部的夹子内。左手握紧提取室中部,右手握紧抽提瓶磨砂 口部 ,小心地从水浴锅中将二者取出放稳在实验台上。然后一手握抽提室中部,手握提取瓶磨砂口处,左右手反方向适当用力从提取瓶上取下抽提室,放稳提取 瓶后,拿好提取室将其下部对准已拧开盖子的乙醚瓶口部;左手握紧乙醚瓶,右 手握紧提取室,适当倾斜待乙醚沿抽提室旁的细管流下时扶正抽提室和乙醚瓶使抽提室中的乙醚全部流到回收瓶后,取下抽提室和抽提瓶旋转连接小心将二者放到水浴锅中,左手握紧抽提室并注意向下的力量,然后和冷凝管连接以进行下一次回收。每个提取室中原来添加的乙醚只需反复回收2—3次即可回收干净。回收完成后注意将冷凝管安全固定在索氏脂肪提取器上部。关闭电源和冷凝水。回收的乙醚不能再用于抽提粗脂肪,应在乙醚瓶外标明。将抽提室中的滤纸包倒出后,抽提室不要水洗即可放置在适当的地方。用滤纸或干净的抹布擦净提取瓶的外部然后放于烘箱中于105℃烘2h,取出放于干燥器中半个小时后称重,再将提 取瓶放于烘箱中烘30min冷却后称量,两次称量差不超过0.001g即为恒重。
6. 测定结果
样品含量在10%以上时,相对偏差允许3% ;在10%以下时,允许相对偏差5% 。否则重做。
7. 提取粗脂肪
因时间较长,注意一定要合理安排时间,最好前一天将抽提瓶和滤纸包好的饲料烘好,第2天上班时即进行抽提,这样到下午1~2点时抽提结束,待全部回收结束时间在2—3点,然后烘干脂肪抽提瓶需要2—3h,待结束后刚好下班。回收的抽提瓶应及时烘干,不能长时间放置否则会因脂肪氧化增重而影响测试 结果。
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