高效液相色谱法检查中药保健品中8种激素类成分

高效液相色谱法检查中药保健品中8种激素类成分

　　激素类药物是临床上广泛使用的一种抗炎、抗过敏、抗风湿药物。笔者曾采用不同比例的乙腈& 水进行梯度洗脱，分离了氢化可的松等10 种激素药物，在此基础上又重新设计流动相梯度洗脱方法，同时分离10 种成分之外的8 种常用激素成分(泼尼松、醋酸氢化泼尼松、醋酸氟氢可的松、丁酸氢化可的松、醋酸去炎松、哈西奈德、丙酸氯倍他索、丙酸倍氯米松)，且均达到基线分离。用该方法检测市场抽样的中药制剂喘金宝，操作简便，结果准确可靠，现报道如下。

　　1 仪器与试药

　　LC7000型高效液相色谱仪(济南海能)，hanonclarity工作站。

　　泼尼松、醋酸氢化泼尼松、醋酸氟氢可的松、丁酸氢化可的松、醋酸去炎松、哈西奈德、丙酸氯倍他索、丙酸

　　倍氯米松对照品均购于中国药品生物制品检定所;中药制剂喘金宝为市场抽检样品;乙腈为色谱纯;试验用水为纯化水。

　　2 方法和结果

　　2.1 色谱条件及系统适用性试验

　　色谱柱：C184.6*250mm柱;

　　流动相：A乙腈- B水;梯度洗脱方法：0-4(A35%)-34(A75%)-29(A35%)-40(A35%)。

　　二极管阵列检测器

　　检测波长：240nm;

　　柱温：室温;

　　流速：1ml/min;

　　进样量：10ul

　　8种成分分离效果良好，拖尾因子均在1.0左右，理论塔板数均在8000-10000。色谱图

　　见图1。

　　2.2 线性关系考察

　　分别称取上述8种激素对照品适量，置同一50ml 容量瓶中，用乙醇溶解并稀释至刻度，按上述色谱条件记录色谱图。以质量浓度(X)为横坐标、峰面积(Y)为纵坐标进行线性回归，在线性范围内8种成分的质量浓度与峰面积均呈良好的线性关系,见表1。

　　2.3 精密度试验

　　取混合对照品溶液，连续进样6次，记录色谱图。结果8种激素成分的RSD均小于1.0% ，表明仪器精密度良好。

　　2.4 耐用性试验

　　取混合对照品溶液，分别采用不同品牌的色谱柱和不同型号的液相色谱仪照拟订的方法操作，结果8种成分仍能够很好地分离且保留时间合理。

　　2.5最小检出量确定

　　分别称取上述8种激素对照品适量，用乙醇溶解并稀释后，分别测定最小检出量。泼尼松、醋酸氢化泼尼松、醋酸氟氢可的松、丁酸氢化可的松、醋酸去炎松、哈西奈德、丙酸氯倍他索、丙酸倍氯米松的最小检出量分别为21.7;26.0;23.5;23.3;25.9;15.4;26.5;30.6ng/ml。

　　2.6 中药制剂中激素成分检查

　　取市售喘金宝蜜丸3粒，粉碎后用适量乙醇超声溶解，离心，取上清液10ul进样，记录色谱图。结果在与泼尼松对照品相同峰位处检出该制剂中掺入的泼尼松。色谱图图2。

　　3 讨论

　　3.1 采用文中色谱条件可直接进行色谱-质谱(LCMS)检测，并同时得到8种激素的质谱峰，且准确度和分离度均良好。

　　3.2 用二极管阵列检测器对混合对照品溶液进行全波长扫描，结果8种激素成分的紫外图谱极为相似，因此通过比较色谱峰的紫外图谱也可快速鉴别中药制剂中是否含有激素成分。